细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号触发的程序性细胞死亡方式。其主要特征包括细胞膜穿孔和细胞肿胀破裂，这一过程依赖于炎性半胱天冬酶（Caspase），特别是caspase-1、4、5和11，并伴随着大量促炎因子（如IL-1β、IL-18）的释放。细胞焦亡的形态特征、发生机制及其调控方式与凋亡、坏死等其他细胞死亡形式显著不同。

尊龙凯时推出的BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒采用比色光度法，通过检测细胞焦亡相关的酶Caspase的活化情况以及细胞质膜破裂情况来评估细胞死亡状态。本试剂盒的工作原理是基于Caspase-1/4/5对相应底物的催化，产生黄色的pNA，而pNA在405 nm波长处具有强吸收性，因此可以通过测定吸光度来检测细胞焦亡相关蛋白的活性。同时，试剂盒还配备了非通透性荧光探针，用于检测细胞质膜的完整性。

BBcellProbe®试剂盒可以使用酶标仪、荧光酶标仪或容量不超过100 μl的分光光度计和荧光光度计进行检测，适用于培养细胞的焦亡检测。为提高灵敏度，建议具有荧光检测条件的实验室选择尊龙凯时的荧光法检测试剂盒。若没有荧光检测条件，仍可选择比色法细胞焦亡检测产品，但需确保样品中细胞焦亡程度足够高。

检测方法：

• 酶标仪/荧光酶标仪
• 分光光度计/荧光光度计
• 激光共聚焦显微镜
• 流式细胞仪

样本类型：

• 细胞

实验步骤：

1. 配制裂解缓冲液和检测缓冲液。
2. 样品处理：
   1. 收集细胞，离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽量吸干，收集细胞。
   2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽量吸干上清。
   3. 在细胞中加入50 μl冷裂解缓冲液，进行高速涡旋振荡15秒。
   4. 在冰上持续振荡25-40分钟。
   5. 在4℃、10000×g条件下离心10分钟。
   6. 将上清液转入预先冷却的干净离心管中，保存在冰上或-80℃冰箱中备用。
3. 对上述处理过的上清液进行蛋白定量。
4. 进行焦亡检测。

选择尊龙凯时的BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒，确保您在生物医疗研究中获得最准确的结果。